期刊简介
本刊是国家级临床医学类核心期刊，是解剖学基础研究与临床应用相结合的学术园地，旨在加强解剖学基础理论研究与临床实践工作紧密结合，以促进现代临床医学的发展，侧重发表与临床应用密切相关的应用解剖学、实验形态学、临床生物力学等方面的学术论著。读者对象为显微外科、手外科、骨科、整形外科、神经外科、泌尿外科、肝胆外科、胸心血管外科、颌面外科、耳鼻咽喉外科、中医外科以及放射科医师和解剖学工作者。
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首页>中国临床解剖学杂志
- 杂志名称：中国临床解剖学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国解剖学会
- 国际刊号：1001-165X
- 国内刊号：44-1153/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中)
构建与制备RhoA-GTPase突变体慢病毒
李良平；顾晶晶；王斌；李娟；张磊；张琳；张璐
关键词：RhoA-GTPase, 慢病毒, 绿色荧光蛋白, 生物学活性
摘要：目的 构建携带绿色荧光蛋白的RhoA显性负效突变体(RhoAN 19)和组成型活性突变体(RhoAL63)慢病毒.方法 构建RhoAN 19和RhoAL63慢病毒表达质粒,并以酶切及序列测定方法进行鉴定.利用ViraPowerTM慢病毒表达系统包装制备RhoA突变体慢病毒上清,用其感染大鼠前皮质神经元,分别进行RhoA生物学活性检测、细胞转染效率鉴定与神经元形态学观察.结果 构建的RhoAN 19和RhoAL63慢病毒表达质粒经酶切与测序鉴定正确,包装的慢病毒滴度为1×106 TU/ml.用制备的慢病毒上清感染原代培养的前皮质神经元,生物学活性检测结果显示RhoAN 19慢病毒显著抑制溶血磷脂酸( LPA)诱导的RhoA活性的升高,而RhoAL63慢病毒感染神经元后RhoA活性显著升高.感染效率鉴定结果显示病毒上清可感染80％以上的前皮质神经元.形态学观察显示经慢病毒感染后的神经元其胞体与树突分支清晰可见.结论 成功制备了RhoA突变体慢病毒,并成功实现了慢病毒感染前皮质神经元,为进一步研究Rho蛋白家族信号通路提供了研究工具.
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